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乔羽生物:ELISA试剂盒实验前如何做好优化?
发布时间:2019-03-25   点击次数:72次

ELISA检测试剂盒包被条件的优化:
1、包被液的挑选:通常常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,假如包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以运用pH7.2的磷酸盐缓冲液。
2、包被浓度的挑选:包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质改变,通常蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要清晰对于特定包被抗原的最适包被浓度需求通过试验来断定。
3、包被温度的挑选:通常是4-8度条件下放置一个黑夜或者37度保温2小时,咱们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的坚持。
4、包被抗原的挑选:可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,因为分子量太小,通常难于直接吸附在酶标板上,通常都先使其与无关蛋白质,比如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。


ELISA检测试剂盒加样的优化:
    在这一进程中,通常状况下有三次加样,它们分别是加标本,加酶联xi物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质部分浓缩,散布不均,应充沛混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、缩短后即可获得。也可在板孔中参加稀释液,再在其参加血清标本,然后在微型震动器上震动1分钟以保证混和。通常说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超越一星期测定的需低温冰存。


生物试剂的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。

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